旋毛蟲Ts-Sp-7蛋白的表達純化及其多克隆抗體的制備
張勝蘭; 劉琰; 李巖松; 劉曉雷; 白雪; 唐斌; 王學林; 劉明遠; 周玉 吉林大學動物醫學學院/人獸共患病研究教育部重點實驗室; 吉林長春130062; 長江大學動物科學學院; 湖北荊州434023
- 旋毛蟲
- 原核表達
- 間接免疫熒光
摘要：為給旋毛蟲病的診斷及疫苗研制提供備選抗原,對本實驗室獲得的旋毛蟲Ts-Sp-7基因(GenBank登錄號EU263332.1)進行PCR擴增,構建原核表達載體,進行表達純化,Western-blot分析。制備多克隆抗體進行間接免疫熒光分析。通過PCR擴增出1372 bp的Ts-Sp-7基因。SDS-PAGE結果顯示,該蛋白大小為46 ku左右,與理論分子質量一致。Western-blot結果顯示,該目的蛋白與10000條/頭感染劑量不同感染時間的豬陽性血清均呈現特異性條帶。制備的多克隆抗體效價為1∶350000。Ts-Sp-7多克隆抗體的間接免疫熒光鑒定結果顯示,Ts-Sp-7蛋白在旋毛蟲肌幼蟲期存在于蟲體表面。
注：因版權方要求，不能公開全文，如需全文，請咨詢雜志社
