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玉米質(zhì)膜內(nèi)在蛋白ZmPIP2;6響應(yīng)滲透、鹽和干旱脅迫的功能鑒定

周練; 熊雨涵; 洪祥德; 周京; 劉朝顯; 王久光; 王國強; 蔡一林 西南大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物科技學(xué)院玉米研究所; 重慶400715
  • 玉米
  • 質(zhì)膜內(nèi)在蛋白
  • 滲透脅迫
  • 干旱脅迫
  • 鹽脅迫

摘要:【目的】質(zhì)膜內(nèi)在蛋白(plasma membrane intrinsic proteins,PIPs)廣泛存在于植物細胞的膜系統(tǒng)上,在植物體內(nèi)水分運輸和水分平衡的過程中至關(guān)重要。對ZmPIP2;6在植物水分脅迫耐性中的功能進行探究,為玉米培育抗旱耐鹽新品種提供優(yōu)秀基因資源?!痉椒ā糠治霾⒈葘mPIP2;6與其他物種中報道參與水分脅迫的PIPs的氨基酸序列,構(gòu)建ZmPIP2;6-GFP載體并通過PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化玉米原生質(zhì)體,對ZmPIP2;6進行亞細胞定位。采集玉米的不同組織樣品,包括根、莖、葉、未成熟雄穗、未成熟雌穗、胚和胚乳;對玉米進行PEG或NaCl處理,在處理的不同時間點采集玉米的根和葉樣品。提取總RNA并通過qRT-PCR調(diào)查ZmPIP2;6在玉米不同組織以及在水分脅迫下的表達模式。構(gòu)建ZmPIP2;6超表達載體,發(fā)展并鑒定ZmPIP2;6超表達擬南芥材料,觀察轉(zhuǎn)基因植株對滲透、鹽及干旱脅迫的耐性生理表型,并測量其根長、葉片水分散失率等性狀。檢測在干旱或鹽脅迫條件下,擬南芥脅迫信號通路上的相關(guān)基因在ZmPIP2;6超表達植株中的表達。【結(jié)果】氨基酸序列分析比對結(jié)果顯示ZmPIP2;6具有PIP蛋白的典型結(jié)構(gòu)與并且其他物種的PIP蛋白具有很高的同源性。轉(zhuǎn)化玉米原生質(zhì)體試驗結(jié)果顯示ZmPIP2;6蛋白定位在細胞質(zhì)膜。qRT-PCR結(jié)果顯示ZmPIP2;6在玉米未成熟雄穗中表達量最高,并且在玉米受到滲透和鹽脅迫后根和葉中的ZmPIP2;6表達受到顯著誘導(dǎo)。在MS固體培養(yǎng)基上進行滲透脅迫處理和鹽脅迫處理以及進一步的土培試驗中進行干旱脅迫處理,ZmPIP2;6超表達擬南芥植株相對野生型都顯示出更強的脅迫耐性。在干旱或鹽脅迫條件下,擬南芥脅迫信號通路上的相關(guān)基因在ZmPIP2;6超表達植株中的表達受到不同程度的影響?!窘Y(jié)論】玉米內(nèi)在質(zhì)膜蛋白基因ZmPIP2;6在滲透或鹽脅迫下表達上調(diào),在擬南芥中超表達ZmPIP2;6會增強植株對滲透、鹽和干旱脅

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