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小反芻獸疫病毒間接化學發光抗體檢測方法的建立與優化

任雪建; 李秀梅; 楊曉帆; 李亞靜; 楊志; 耿玉靜; 呂園園 洛陽現代生物技術研究院有限公司; 河南洛陽471000
  • 原核表達
  • 最適條件
  • 臨界值

摘要:構建了原核表達質粒pET-28a-N,經原核表達純化獲得小反芻獸疫病毒N蛋白。將純化的小反芻獸疫病毒N蛋白與對應的酶標二抗配對,通過對各個反應條件的優化建立了間接化學發光抗體檢測方法。通過對血清樣本的檢測,對該方法的敏感性、特異性、重復性、符合率進行了評價。試驗結果顯示:N蛋白最適包被濃度為0.5μg/mL,最適包被條件為4℃24 h;酶標二抗最適工作濃度為1∶2000。特異性試驗證明,該方法與羊常見病毒的抗體陽性血清沒有交叉反應。通過檢測大量小反芻獸疫病毒抗體陰、陽型血清,確定了科學的判定標準。

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現代畜牧科技

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主管單位:黑龍江省畜牧獸醫局;主辦單位:黑龍江省畜牧研究所

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