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miRNA-301a-3p調控結直腸癌對5-氟尿嘧啶敏感性的機制研究

王龍飛; 彭洪; 蘇強; 杜經緯; 張濤; 田云鴻 南充市中心醫院藥學部; 四川南充637000; 南充市中心醫院中西醫結合肛腸科; 四川南充637000; 南充市中心醫院耳鼻喉科; 四川南充637000; 南充市中心醫院消化內科; 四川南充637000; 南充市中心醫院胃腸外科; 四川南充637000
  • pten蛋白
  • akt蛋白
  • 結直腸癌

摘要:目的探討miRNA-301a-3p對結直腸癌細胞HCT-8化療敏感性的影響及可能的作用機制。方法采用CCK-8法檢測結直腸癌親本細胞株HCT-8和對5-氟尿嘧啶(5-FU)耐藥細胞株HCT-8/FU化療敏感性,RT-PCR法檢測miRNA-301a-3p和PTEN基因在HCT-8和HCT-8/FU細胞中的表達。在HCT-8/FU細胞中轉染miRNA-301a-3p inhibitor,CCK-8檢測化療敏感性。通過生物信息學軟件分析miRNA-301a-3p的下游靶基因,雙瑩光素酶報告基因法進行驗證。觀察抑制PTEN的表達對化療敏感性的影響,并檢測抑制miRNA-301a-3p表達后對PTEN、AKT及pAKT蛋白表達的影響。結果 HCT-8/FU細胞株的化療敏感性明顯低于HCT-8細胞株。miRNA-301a-3p在HCT-8/FU細胞中的表達明顯高于HCT-8細胞,但PTEN在HCT-8/FU細胞中的表達則明顯低于HCT-8細胞。miRNA-301a-3p inhibitor抑制HCT-8/FU細胞中miRNA-301a-3p的表達后,HCT-8/FU細胞化療敏感性明顯增高。PTEN是miRNA-301a-3p的靶基因。抑制PTEN表達可降低HCT-8/FU細胞化療敏感性,抑制miRNA-301a-3p表達可提高PTEN蛋白表達,并下調pAKT蛋白表達。結論下調HCT-8/FU細胞株中miRNA-301a-3p的表達可提高細胞的化療敏感性,其機制可能與miRNA-301a-3p/PTEN/AKT信號通路有關。

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