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Bacillus malacitensis Z-5菌株合成抑菌物質培養基優化及成分鑒定

高宇; 陳堯堯; 劉憶杰; 陳曉萌; 高同國; 張冬冬 河北農業大學生命科學學院; 河北保定071001
  • 棉花黃萎病
  • bacillus
  • malacitensis
  • 拮抗
  • 脂肽抗生素

摘要:【目的】Bacillus malacitensis Z-5菌株對棉花黃萎病有顯著防治效果,產生抑菌物質是其發揮防治作用的主要因素。本研究旨在優化Z-5菌株產生抑菌物質的培養基組成,分析抑菌物質的成分及其合成相關基因。【方法】由單因素試驗確定最佳碳源、氮源及無機鹽,利用最速上升法確定碳源、氮源以及無機鹽最優含量區域,根據Box-Behnken試驗設計,以發酵上清液對棉花黃萎病菌大麗輪枝菌(Verticillium dahlia Kleb.)的拮抗活性為指標,篩選Z-5菌株產生抑菌物質的最優培養基組成。利用液相色譜-質譜聯用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer,LC-MS)法鑒定抑菌物質,并對抑菌物質合成相關基因進行檢測。【結果】Z-5菌株產生抑菌物質最佳培養基組成為2.68%(質量分數,下同)玉米粉、1.45%酵母粉、0.03%K2SO4、0.8%Na2HPO4·12H2O、0.2% NaH2PO4·2H2O(pH 7.2~7.4),抑菌圈直徑為1.34 cm,與預測值相近,證實該模型可靠有效。抑菌物質主要為脂肽抗生素C14表面活性素B,C14~C17伊枯草菌素A,C14、C15、C17伊枯草菌素B等。聚合酶鏈式反應檢測結果顯示,Z-5菌株基因組含有合成脂肽抗生素的基因srf AB、ituC和ituD。【結論】本研究優化了Z-5菌株產生抑菌物質的培養基組成,明確了其抑菌物質為脂肽抗生素,為利用該抑菌物質進行棉花黃萎病菌的防治提供了理論參考和物質基礎。

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