骨髓間充質細胞與多系分化持續應激細胞的蛋白質譜分析比較
趙雅玉; 費穎; 季煜華; 王曉冬; 陳罡 南通大學江蘇省神經再生重點實驗室; 江蘇226001; 南通大學醫學院組織學與胚胎學系; 江蘇226001
- 骨髓間充質細胞
- 多系分化持續應激細胞
- 蛋白質譜分析
摘要：目的:比較骨髓間充質細胞(hBMSCs)和多系分化持續應激細胞(Muse細胞)蛋白表達的差異。方法:通過密度梯度離心和差速貼壁法從健康人骨髓中分離得到hBMSCs,流式細胞儀檢測其中SSEA-3/CD105雙陽性細胞;利用長時間胰酶孵育法從hBMSCs中分離得到Muse細胞,利用qPCR技術在mRNA水平檢測多能干細胞標記物的表達情況;提取hBMSCs和Muse細胞蛋白,應用iTRAQ標記結合online 2D LC/MS/MS蛋白組學技術定量評估蛋白質表達譜。結果:hBMSCs中SSEA-3和CD105雙陽性細胞占0.51%;長時間胰酶孵育法可以成功分離出Muse細胞,懸浮可呈球狀生長,且SSEA-3、Sox-2、Oct-4表達均高于hBMSCs;蛋白質譜共檢測4 377個蛋白,相對于hBMSCs,Muse細胞有27個上調蛋白和68個下調蛋白。結論:hBMSCs和Muse細胞蛋白表達基本相同,僅有95種蛋白存在差異。
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