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二甲雙胍通過三羧酸循環途徑對巨噬細胞線粒體功能的影響

冀東; 黃曉晨; 朱長太 上海海洋大學水產與生命學院; 上海市第六人民醫院東院輸血科; 上海201306
  • 線粒體
  • 炎癥
  • 三羧酸循環
  • 二甲雙胍
  • 線粒體自噬

摘要:目的:通過對三羧酸循環(TCA)中的關鍵酶在炎癥與抗炎時表達量的變化來分析二甲雙胍(Met)對線粒體功能的影響.方法:用質量濃度為1μg/mL的脂多糖(LPS)刺激巨噬細胞,誘導出炎癥,采用濃度為5 mmoL/L的Met對巨噬細胞進行抗炎處理,用流式細胞儀檢測線粒體活性氧(ROS),使用Real-time PCR技術和Western Blot技術分析由LPS誘導出炎癥和Met抗炎后的巨噬細胞線粒體中TCA循環通路的變化,用Western Blot技術測定線粒體自噬相關蛋白的變化,使用線粒體膜電位檢測線粒體功能,以此推測TCA循環通路對線粒體功能的影響.結果:LPS刺激巨噬細胞8 h后誘導出巨噬細胞炎癥,此時TCA循環通路中的關鍵酶表達水平降低,線粒體ROS升高,線粒體膜電位升高;Met抗炎后TCA循環中的關鍵酶表達增高,線粒體ROS降低,線粒體膜電位降低,線粒體自噬相關蛋白Beclin-1和LC3b表達量顯著降低.結論:線粒體TCA循環在炎癥狀態下會被抑制,造成線粒體能量代謝失衡;Met能夠抑制炎癥,減弱線粒體自噬功能,同時抗炎狀態會對TCA循環起到修復作用,使線粒體功能趨于穩定.

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暨南大學學報·自然科學與醫學版

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